細胞增殖實驗技術服務

簡要描述：細胞增殖實驗技術服務包括MTT實驗、CCK-8實驗、平板克隆、劃痕實驗等，由達為科生物細胞平臺的實驗人員操作完成。細胞平臺所有實驗員均有豐富的實驗經驗，熟練的操作技術。

更新時間：2022-12-22
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細胞增殖是生物體的重要生命特征，單細胞生物以細胞分裂的方式產生新的個體，多細胞生物以細胞分裂的方式產生新的細胞，用來補充體內衰老和死亡的細胞。

CCK-8常應用于檢測細胞的增殖能力。CCK-8試劑中含有WST–8：化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪*（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臜產物（Formazan）。生成的甲臜物的數量與活細胞的數量成正比，用酶標儀在450nm波長處測定其吸光度值（OD值）來判斷活細胞數量，OD值越大，細胞活性越強（如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越?。?。

MTT常應用于檢測細胞的增殖能力，其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚（Formazan），并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶標儀在490nm波長處測定其吸光度值（OD值），在一定細胞數范圍內，MTT結晶形成的量與細胞數成正比。根據測得的吸光度值（OD值）來判斷活細胞數量，OD值越大，細胞活性越強（如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越?。?。

單個細胞在體外增殖6代以上（時間約1周以上），其后代所形成的細胞群體，稱為集落或克隆。每個克隆含有50個以上的細胞，大小在0.3-1.0mm之間。細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數，但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖并形成克隆。只有同時具有貼壁和增殖活力的細胞才會形成克隆。

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